Vantaggi di NMNH
NMNH: 1. "Bonzyme" Metodo enzimatico completo, rispettoso dell'ambiente, senza residui di solventi nocivi per la produzione di polvere. 2. Bontac è una primissima produzione al mondo a produrre la polvere NMNH a livello di elevata purezza, stabilità. 3. Esclusiva tecnologia di purificazione in sette fasi "Bonpure", elevata purezza (fino al 99%) e stabilità di produzione della polvere NMNH 4. Fabbriche di proprietà e ottenuto una serie di certificazioni internazionali per garantire un'alta qualità e una fornitura stabile di prodotti di polvere NMNH 5. Fornire un servizio di personalizzazione della soluzione del prodotto one-stop
Vantaggi del NADH
NADH: 1. Metodo enzimatico completo Bonzyme, rispettoso dell'ambiente, senza residui di solventi nocivi 2. Esclusiva tecnologia di purificazione Bonpure in sette fasi, purezza superiore al 98% 3. Speciale forma cristallina di processo brevettata, maggiore stabilità 4. Ha ottenuto una serie di certificazioni internazionali per garantire un'alta qualità 5. 8 brevetti NADH nazionali ed esteri, leader del settore 6. Fornire un servizio di personalizzazione della soluzione del prodotto one-stop
Vantaggi del NAD
NAD: 1. Metodo enzimatico completo "Bonzyme", rispettoso dell'ambiente, senza residui di solventi nocivi 2. Fornitore stabile di 1000+ imprese in tutto il mondo 3. Esclusiva tecnologia di purificazione in sette fasi "Bonpure", contenuto di prodotto più elevato e tasso di conversione più elevato 4. Tecnologia di liofilizzazione per garantire una qualità stabile del prodotto 5. Tecnologia cristallina unica, maggiore solubilità del prodotto 6. Fabbriche di proprietà e ottenimento di una serie di certificazioni internazionali per garantire un'alta qualità e una fornitura stabile di prodotti
Vantaggi di MNM
NMN: 1. Metodo enzimatico completo "Bonzyme", rispettoso dell'ambiente, senza residui di solventi nocivi 2. Esclusiva tecnologia di purificazione in sette fasi "Bonpure", elevata purezza (fino al 99,9%) e stabilità 3. Tecnologia leader industriale: 15 brevetti NMN nazionali e internazionali 4. Fabbriche di proprietà e ottenimento di una serie di certificazioni internazionali per garantire alta qualità e fornitura stabile di prodotti 5. Diversi studi in vivo dimostrano che Bontac NMN è sicuro ed efficace 6. Fornire un servizio di personalizzazione della soluzione del prodotto one-stop 7. Fornitore di materie prime NMN del famoso team di David Sinclair dell'Università di Harvard
Abbiamo le migliori soluzioni per il tuo business
Bontac Bio-Engineering (Shenzhen) Co., Ltd. (di seguito denominata BONTAC) è un'impresa high-tech fondata nel luglio 2012. BONTAC integra ricerca e sviluppo, produzione e vendita, con la tecnologia di catalisi enzimatica come nucleo e coenzima e prodotti naturali come prodotti principali. Ci sono sei serie principali di prodotti in BONTAC, che coinvolgono coenzimi, prodotti naturali, sostituti dello zucchero, cosmetici, integratori alimentari e intermedi medici.
In qualità di leader delNMNBONTAC ha la prima tecnologia di catalisi enzimatica intera in Cina. I nostri prodotti a base di coenzima sono ampiamente utilizzati nell'industria sanitaria, nella medicina e nella bellezza, nell'agricoltura verde, nella biomedicina e in altri campi. BONTAC aderisce all'innovazione indipendente, con oltre170 brevetti di invenzione. A differenza della tradizionale industria della sintesi chimica e della fermentazione, BONTAC presenta i vantaggi della tecnologia di biosintesi ecologica a basse emissioni di carbonio e ad alto valore aggiunto. Inoltre, BONTAC ha istituito il primo centro di ricerca sulla tecnologia dell'ingegneria dei coenzimi a livello provinciale in Cina, che è anche l'unico nella provincia del Guangdong.
In futuro, BONTAC si concentrerà sui vantaggi della tecnologia di biosintesi verde, a basse emissioni di carbonio e ad alto valore aggiunto, e costruirà relazioni ecologiche con il mondo accademico e con i partner a monte/a valle, guidando continuamente l'industria biologica sintetica e creando una vita migliore per gli esseri umani.
Efficacia della polvere di NAD in salute
Le molecole che possono essere assunte sotto forma di integratore per aumentare i livelli di NAD nell'organismo sono indicate da alcuni come "booster di NAD". Gli studi condotti negli ultimi sessant'anni suggeriscono che i seguenti sono alcuni dei numerosi benefici associati all'assunzione di un integratore di NAD:
Può aiutare a ripristinare la funzione mitocondriale
Aiuta a riparare i vasi sanguigni: uno studio sui topi del 2018 ha scoperto che l'integrazione potrebbe aiutare nella riparazione e nella crescita dei vasi sanguigni invecchiati. Ci sono anche alcune prove che può aiutare a gestire i fattori di rischio di malattie cardiache come l'ipertensione e il colesterolo alto.
Può migliorare la funzione muscolare — Uno studio sugli animali condotto nel 2016 ha rilevato che i muscoli degenerativi hanno migliorato la funzione muscolare quando integrati con precursori del NAD+.
Aiuta potenzialmente a riparare le cellule e il DNA danneggiato — Alcuni studi hanno trovato prove che l'integrazione di precursori del NAD+ porta a un aumento della riparazione dei danni al DNA. Il NAD+ è scomposto in due parti componenti, nicotinamide e ADP-ribosio, che si combinano con le proteine per riparare le cellule.
Può aiutare a migliorare la funzione cognitiva — Diversi studi condotti sui topi hanno scoperto che i topi trattati con precursori del NAD+ hanno sperimentato miglioramenti nella funzione cognitiva, nell'apprendimento e nella memoria. I risultati hanno portato i ricercatori a credere che l'integratore di NAD possa aiutare a proteggere dal declino cognitivo/morbo di Alzheimer.
Uno studio del 2012 ha dimostrato che quando i topi alimentati con una dieta ricca di grassi hanno ricevuto un integratore di NAD, hanno guadagnato il 60% in meno di peso rispetto alle stesse diete senza l'integratore. Uno dei motivi per cui questo può essere vero è che la nicotinammide adenina dinucleotide aiuta a regolare la produzione di ormoni legati allo stress e all'appetito, grazie ai suoi effetti sui ritmi circadiani.
I precursori sono molecole utilizzate nelle reazioni chimiche all'interno del corpo per creare altri composti. Ci sono una serie di precursori del NAD+ che si traducono in livelli più elevati quando ne si consuma abbastanza.
Caratteristiche e vantaggi del prodotto BONTAC NAD
1 、 In qualità di produttore NAD con tecnologia avanzata, BONTAC sceglie il metodo enzimatico, rispettoso dell'ambiente, senza residui di solventi nocivi per la produzione di polvere
2、Elevata purezza (fino al 99%) e stabilità di produzione della polvere di NAD
3 、 Fabbriche di proprietà e ottenuto una serie di certificazioni internazionali per garantire un'alta qualità e una fornitura stabile di prodotti di polvere NAD
4、Diversi studi in vivo dimostrano che Bontac NAD polvere è sicuro ed efficace
5、Fornire un servizio di personalizzazione della soluzione di prodotto one-stop
Metodo di produzione della polvere di NAD
I metodi di preparazione utilizzati dai produttori di tutto il mondo di polvere di NAD si dividono principalmente in metodo di sintesi chimica e metodo biocatalitico, tra i quali il metodo biocatalitico include il metodo di fermentazione biologica e il metodo di catalisi enzimatica. Il metodo di catalisi enzimatica è gradualmente diventato la direzione principale a causa dei suoi vantaggi di verde, protezione ambientale e assenza di inquinamento. E poi la purezza della polvere di NAD raggiungerà il 99% dopo la procedura di ulteriore purificazione. Ma alcuni produttori di NAD tendono a scegliere i metodi multipli per sviluppare la produzione di NAD.
Recensioni degli utenti
Cosa dicono gli utenti informazioni su BONTAC
Domande frequenti
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1.Prevenzione e trattamento delle tempeste infiammatorie indotte da virus
Gli scienziati hanno scoperto, dopo un'ampia ricerca, che il neo-coronavirus ha un meccanismo simile al virus della SARS per attivare le vescicole infiammatorie NLRP3. e l'attivazione di NLRP3 produce più fattori infiammatori, generando un'infiammazione eccessiva e innescando così una tempesta mortale di citochine. Questo problema può essere ben affrontato dal NAD+, che inibisce l'attività della via infiammatoria NF-κB e dell'inflammasoma NLRP3 aumentando l'attività delle sirtuine (SIRT1, SIRT2 e SIRT3), prevenendo così la tempesta di citochine causata da un'eccessiva infiammazione. Pertanto, Sinclair e altri scienziati ritengono che l'aumento della concentrazione di NAD+ possa svolgere un ruolo importante nella prevenzione e nel trattamento del neocoronavirus e di altre infezioni virali.
2.Ripristino dei disordini metabolici indotti da virus
Il NAD+ è un coenzima essenziale per molte vie metaboliche dell'energia cellulare, presente in ogni cellula del corpo, coinvolto in migliaia di reazioni e un attore importante nel mantenimento della vitalità cellulare. Nel modello di infezione da COVID-19, l'integrazione di NAD+ e NMN si è rivelata efficace nell'alleviare la morte cellulare e proteggere il polmone.
Innanzitutto, ispeziona la fabbrica. Dopo alcuni controlli, i produttori NAD che si rivolgono direttamente ai consumatori prestano maggiore attenzione alla costruzione del marchio. Pertanto, per un buon marchio, la qualità è la cosa più importante e la prima cosa per controllare la qualità delle materie prime è ispezionare la fabbrica. L'azienda Bontac produce attualmente polvere di NAD di alta qualità con le caterias di SGS. In secondo luogo, la purezza viene testata. La purezza è uno dei parametri più importanti della polvere di NAD. Se non è possibile garantire un'elevata purezza del NAD, è probabile che le sostanze rimanenti superino gli standard pertinenti. Come dimostrano i certificati allegati, la polvere di NAD prodotta da Bontac raggiunge la purezza del 99,9%. Infine, è necessario uno spettro di test professionale per dimostrarlo. I metodi comuni per determinare la struttura di un composto organico includono la spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR) e la spettrometria di massa ad alta risoluzione (HRMS). Solitamente attraverso l'analisi di questi due spettri, la struttura del composto può essere determinata preliminarmente.
Sul mercato internazionale, gli integratori alimentari NAD+ sono in produzione negli Stati Uniti, l'Australian Food and Drug Administration ha approvato la vendita di prodotti NAD+ e i produttori giapponesi di NAD+ si stanno dedicando ad estendere la quota di mercato in Cina. Li Ka-shing ha investito 200 milioni di HK$ nel produttore statunitense di NAD, i cui prodotti NAD+ sono venduti da Watsons a Hong Kong! Poi anche Mclane, una società di proprietà di Warren Buffett, è entrata nel mercato NAD.
I nostri aggiornamenti e post sul blog
Bontac continua a innovare e ha vinto un brevetto di invenzione straniero
Di recente, una buona notizia è arrivata dall'Ufficio Brevetti giapponese (uno dei più grandi uffici brevetti del mondo) dall'altra parte dell'oceano fino a Shenzhen. Il brevetto per "UNA COMPOSIZIONE STABILE DI NICOTINAMIDE RIBOSIO E IL SUO METODO DI PREPARAZIONE" richiesto da Bontac è stato approvato e rilasciato un certificato. Questo brevetto di invenzione è di grande importanza per la stabilità dei prodotti della serie di coenzimi Bontac. Questo è un altro nuovo brevetto recentemente ottenuto da Bontac dopo aver accumulato più di 150 domande di brevetto. Questi risultati impressionanti nella ricerca scientifica sono senza dubbio il miglior encomio per lo spirito innovativo di Bontac Biotech. Titolo dell'invenzione: UNA COMPOSIZIONE STABILE DI NICOTINAMIDE RIBOSIO E IL SUO METODO DI PREPARAZIONE Vantaggi tecnici: La preparazione artificiale industriale di nicotinamide ribosio ha compiuto notevoli progressi verso la preparazione di nicotinamide ribosio relativamente pura a un costo inferiore. Tuttavia, il monomero diventerà un solido viscoso in pochi secondi o minuti a temperatura e umidità ambiente poiché il nicotinamide ribosio è molto facile da assorbire l'umidità e si disintegrerà in olio entro poche ore. Per mantenere il nicotinamide ribosio come solido secco, deve essere conservato in un ambiente assolutamente asciutto o congelato a circa -20°C, il che limita fortemente l'applicazione commerciale e la promozione del nicotinamide ribosio. Pertanto, lo sviluppo di prodotti stabili a base di nicotinamide ribosio è diventato un problema importante che deve essere risolto con urgenza. Lo scopo della presente invenzione è quello di risolvere il problema tecnico che il monomero di nicotinamide ribosio menzionato nell'arte di sfondo di cui sopra è difficile da preservare e non può essere promosso e applicato perché è molto facile assorbire l'umidità e decomporsi. L'invenzione fornisce una composizione di nicotinamide ribosio con proprietà stabili, facile da conservare, trasportare e utilizzare. Solo innovando continuamente la tecnologia possiamo adattarci alle nuove opportunità della nuova era, "rispondere a tutti i cambiamenti" prima delle nuove sfide e produrre un salto di qualità basato sulla quantità. Nell'attuale situazione favorevole, il piano di innovazione di Bontac Biotech è ancora ininterrotto, concentrandosi sulla direzione generale del mercato, prestando attenzione a ogni anello, risolvendo ogni problema sottile e scrivendo la leggenda di Bontac con l'innovazione attiva. In questa fase, Bontac Bio continuerà a costruire un team di ricerca e sviluppo migliore, ad aumentare gli investimenti nella ricerca scientifica, a creare prodotti migliori per i nostri clienti e a creare un valore maggiore.
Si prevede che i metaboliti di Rg3 aumentino le proprietà antitumorali di Rg3
Introduzione Il raro ginsenosido Rg3, un estratto attivo del Panax ginseng, possiede un'ampia gamma di proprietà farmacologiche tra cui anti-angiogenesi e anti-cancro, con un'elevata lipofilia (log P4 stimato) e una bassa solubilità in acqua a pH 7,4. Tuttavia, la sua permeabilità e biodisponibilità sono relativamente basse e le procedure di produzione sono complesse. Sorprendentemente, i metaboliti di Rg3 hanno un'attività simile e persino più forte di Rg3, aprendo nuove opportunità per la futura terapia adiuvante del cancro. L'associazione del ginsenoside Rg3 e dei suoi metaboliti Esistono due epimeri del ginsenoside Rg3, che possono essere successivamente deglicosilati in epimeri del ginsenoside Rh2 (S-Rh2 e R-Rh2) e del protopanaxadiolo (S-PPD e R-PPD). Le proprietà antitumorali dei metaboliti Rg3 L'angiogenesi e la proliferazione delle cellule tumorali sono entrambi fattori interdipendenti nella progressione tumorale. In termini di antiproliferazione, i metaboliti di Rg3, che inducono l'arresto della fase S e la necroptosi in una linea cellulare di carcinoma mammario triplo negativo umano MDA-MB-231, nonché l'arresto e l'apoptosi di G0/G1 nelle cellule endoteliali della vena ombelicale umana (HUVECs), sono più potenti di Rg3. Il bersaglio clinicamente rilevante dei metaboliti Rg3 sono le cellule endoteliali. Gli effetti anti-angiogenici sono valutati utilizzando il saggio di formazione dell'ansa. Tra i metaboliti di Rg3, S-Rh2 è il più potente inibitore della formazione dell'ansa. VEGFR2 e AQP1 come bersagli di Rh2 Secondo le previsioni del docking molecolare in silico, esiste un buon punteggio di legame tra Rh2/PPD e la tasca di legame dell'ATP di VEGFR2, un regolatore dominante che controlla sia l'angiogenesi fisiologica che patologica. Attraverso il biodosaggio del VEGF, si è scoperto che S-Rh2 è un potente candidato anti-angiogenico con azione modulatoria allosterica sulla funzione di VEGFR2. Inoltre, Rh2 e PPD hanno il potenziale di bloccare AQP1 e AQP5, due membri della famiglia delle acquaporine con ruoli vitali nella proliferazione, migrazione, invasione e angiogenesi. Inoltre, Rg3 è più selettivo per AQP1 e non mostra un buon punteggio di legame con AQP5. Alla luce di ciò, il blocco della funzione del canale dell'acqua di AQP1 può avere un ruolo immediato nell'inibizione della formazione dell'ansa e negli effetti anti-angiogenici di Rh2. Conclusione I metaboliti di Rg3 potrebbero potenzialmente aumentare le proprietà antitumorali di Rg3. L'applicazione di queste molecole da sole o insieme può essere una potente alternativa per la futura terapia adiuvante del cancro. Riferimento Nakhjavani M, Smith E, Yeo K, et al. Attività antiangiogeniche e antitumorali differenziali dei metaboliti attivi del ginsenosido Rg3. J Ginseng Res. 2024; 48(2):171-180. DOI:10.1016/j.jgr.2021.05.008 BONTAC Ginsenosidi Dal 2012 BONTAC si dedica alla ricerca e sviluppo, alla produzione e alla vendita di materie prime per coenzima e prodotti naturali, con stabilimenti di proprietà, oltre 170 brevetti globali e un forte team di ricerca e sviluppo. BONTAC vanta una ricca esperienza di ricerca e sviluppo e una tecnologia avanzata nella biosintesi di ginsenosidi rari Rh2/Rg3, con materie prime pure, tasso di conversione più elevato e contenuto più elevato (fino al 99%). In BONTAC è disponibile un servizio completo per soluzioni di prodotto personalizzate. Grazie all'esclusiva tecnologia di sintesi enzimatica Bonzyme, sia gli isomeri di tipo S che quelli di tipo R possono essere sintetizzati con precisione, con un'attività più forte e un'azione di targeting precisa. I nostri prodotti sono sottoposti a rigorosa autoispezione da parte di terzi, che vale la pena di essere affidabile. Disconoscimento Questo articolo si basa sul riferimento nella rivista accademica. Le informazioni pertinenti sono fornite solo a scopo di condivisione e apprendimento e non rappresentano alcuna consulenza medica. In caso di violazione, si prega di contattare l'autore per la cancellazione. Le opinioni espresse in questo articolo non rappresentano la posizione di BONTAC. In nessun caso BONTAC potrà essere ritenuta responsabile in alcun modo per eventuali reclami, danni, perdite, spese, costi o responsabilità di qualsiasi tipo (inclusi, a titolo esemplificativo, eventuali danni diretti o indiretti per perdita di profitti, interruzione dell'attività o perdita di informazioni) derivanti o derivanti direttamente o indirettamente dall'affidamento dell'utente sulle informazioni e sul materiale di questo sito web.
Quantificazione del NAD+ e dei suoi metaboliti nei nervi sciatici di topo
Introduzione Le parti cruciali della nicotinammide adenina dinucleotide (NAD+) e dei suoi metaboliti nell'invecchiamento e nella neurodegenerazione sono state ampiamente riconosciute. Per stimolare il progresso verso la ricerca biochimica e gli interventi mirati all'invecchiamento e alle malattie neurodegenerative, è di grande importanza quantificare con precisione i livelli di NAD+ e dei suoi metaboliti nella via di salvataggio del NAD+. In questo caso, viene applicato un metodo LC-MS/MS robusto e accurato per quantificare i livelli di NAD+ e dei suoi metaboliti nel nervo sciatico di topo normale e danneggiato. Limitazioni dei metodi esistenti per quantificare il NAD+ e i suoi metaboliti I metodi tradizionali per quantificare il NAD+ e i suoi metaboliti, come l'HPLC-UV, NMR, l'elettroforesi della zona capillare o i saggi enzimatici colorimetrici, devono affrontare varie sfide in termini di sensibilità, selettività e misurazione indiretta. Per quanto riguarda i test LC-MS/MS esistenti per le misure cellulari o tissutali di NAD+ e dei suoi metaboliti, ci sono ancora molte difficoltà da superare, come tempi di esecuzione prolungati, scarso comportamento di ritenzione cromatografica e forme dei picchi insoddisfacenti. Inoltre, solo da una a tre sostanze nella via di recupero del NAD+ possono essere coperte da questi metodi. Le modifiche del metodo LC-MS/MS Sulla base dei test LC-MS/MS esistenti, vengono effettuate le modifiche relative alle condizioni cromatografiche, alla matrice surrogata e alle condizioni MS/MS. In particolare, 5 μM di acido metilene fosfonico sono impiegati come additivo per la fase mobile, che promuove esplicitamente l'intensità del segnale e la forma del picco. Data la natura relativamente pulita e semplice dei campioni mai e le loro piccole dimensioni, l'acqua ultrapura viene testata come matrice sostitutiva. Al posto della colonna per cromatografia liquida con interazione idrofila e della colonna per ipercarboidrati, viene utilizzata la colonna Waters Atlantis Premier BEH C18 AX, la cui esclusiva tecnologia di superficie ad alte prestazioni MaxPeak HPS (passivazione della parete interna della colonna, eliminazione della superficie metallica) consente l'elevata riproducibilità, la simmetria dei picchi e la separazione della linea di base di tutti gli analiti. Inoltre, le condizioni MS sono ottimizzate per ridurre al minimo il segnale di interferenza NAD+ nel canale ciclico dell'adenosina difosfato ribosio (cADPR) mantenendo la risposta del cADPR e del mononucleotide di nicotinammide (NMN), con 4000 V per la tensione di spruzzatura ionica, 450 °C per la temperatura del turboriscaldatore, 50 psi per il gas 1, 50 psi per il gas 2, 30 psi per il gas a cortina e 12 psi per il gas di collisione. Cromatogramma rappresentativo di campioni nervosi (normali vs danneggiati) Tutti e cinque gli analiti raggiungono la separazione basale, dove cADPR è un biomarcatore sensibile nel modello di neurodegenerazione. In questo caso, l'assotomia del nervo sciatico induce la degenerazione assonale, portando a una riduzione del livello di NAD+ e a un aumento del livello di NMN nei nervi danneggiati, con conseguente aumento di circa 2 volte del rapporto NMN/NAD+. Contemporaneamente, i livelli di nicotinamide (NAM) e adenosina difosfato ribosio (ADPR) sono diminuiti di circa 2 volte, mentre il livello di cADPR è aumentato di oltre 8 volte. Questi risultati sono coerenti con quelli della ricerca precedentemente riportata, che verifica l'accuratezza di questo metodo LS-MS/MS modificato nella quantificazione del NAD+ e dei suoi metaboliti. Conclusione Questo metodo LC-MS/MS modificato consente un'efficace separazione basale di NAD+, NMN, NAM, ADPR e cADPR in un breve periodo di 5 minuti, contribuendo alla diagnosi precoce di vari disturbi neurologici e allo sviluppo di farmaci per l'invecchiamento e le malattie neurodegenerative. Riferimento Sviluppo e convalida di un metodo LC-MS/MS per quantificare il NAD+ e i metaboliti correlati nei nervi sciatici dei topi e la sua applicazione a un modello animale con lesione nervosa. J Cromatogr A. doi:10.1016/j.chroma.2024.464821 BONTAC NAD Dal 2012 BONTAC si dedica alla ricerca e sviluppo, alla produzione e alla vendita di materie prime per coenzima e prodotti naturali, con stabilimenti di proprietà, oltre 170 brevetti globali e un forte team di ricerca e sviluppo. BONTAC vanta una ricca esperienza di ricerca e sviluppo e tecnologie avanzate nella biosintesi del NAD e dei suoi precursori (es. NMN e NR). Ci sono vari tipi di NAD da selezionare, che comprendono il grado NAD ER (rimozione delle endossina), il grado NAD I (IVD/integratore alimentare/polvere grezza per cosmetici), il grado NAD II (API/intermedi) e il grado IV (se richiesto più elevato sulla solubilità), che può essere fornito sotto forma di polvere liofilizzata o polvere cristallina. La purezza di BONTAC NAD può superare il 98%. Disconoscimento Questo articolo si basa sul riferimento nella rivista accademica. Le informazioni pertinenti sono fornite solo a scopo di condivisione e apprendimento e non rappresentano alcuna consulenza medica. In caso di violazione, si prega di contattare l'autore per la cancellazione. Le opinioni espresse in questo articolo non rappresentano la posizione di BONTAC. In nessun caso BONTAC potrà essere ritenuta responsabile in alcun modo per eventuali reclami, danni, perdite, spese o costi derivanti o derivanti, direttamente o indirettamente, dall'affidamento dell'utente sulle informazioni e sul materiale contenuto in questo sito web.